生物、医药和医疗器械技术

本发明公开了检测BDNF基因启动子区甲基化程度所需引物及其应用，其中引物包括BDNF基因启动子区甲基化特异性扩增引物及焦磷酸测序引物，其中甲基化特异性上游引物核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，下游引物具有序列如SEQ ID NO.2所示，焦磷酸测序引物序列如SEQ ID NO.3所示。优点是该预测试剂盒可以稳定、无创、方便快捷且定量准确、敏感性高和特异性好的在分子水平上预测轻度认知障碍向阿尔茨海默病的转归。

阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease，AD)是一种严重威胁人类健康的神经退行性疾病。轻度认知障碍(Mild cognitive impairment，MCI)是介于AD与正常老龄化之间的一种过渡状态。根据临床表现MCI分为遗忘型和非遗忘型，其中遗忘型MCI(amnestic MCI，aMCI)最为多见，aMCI主要以记忆损害为主，此型的主要结局是发展为AD。研究提示有23％的aMCI患者在2年内，50％患者在4年内进展为AD，故aMCI被认为是AD早期干预治疗的最适阶段。随着我国人口的老龄化，AD的患病率逐年增加，已经成为我国重要的公共卫生问题。目前，AD缺乏有效早期识别和治疗措施，一旦确诊，往往已经达到疾病的中晚期，导致治疗困难。因此，AD的预防性研究成为焦点。

本发明通过研究基线时和五年随访后aMCI患者BDNF基因甲基化水平，寻找出与aMCI向AD转归高度相关的高特异性和敏感性的BDNF基因启动子区甲基化程度作为预测标志物，使用检测该BDNF基因启动子区甲基化程度的引物对其进行甲基化特异性PCR，所得PCR产物经焦磷酸测序可以预测轻度认知障碍向阿尔茨海默病转归，该方法稳定、无创、检测方便快捷、且定量准确，大大提高了疾病预测的敏感性和特异性。并且检测该BDNF基因启动子区甲基化程度的PCR引物可用于预测试剂盒的研制和应用，使得对aMCI向AD的转归预测变得更加方便易行，使得临床医生可以及时评估和预测患者的疾病状态和严重程度，从而及时采取更为有效的个体化防治方案以预防AD的发生和发展。