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一种提高棉花转基因效率的方法

  • 发布时间: 2025-01-09
预算 双方协商
基本信息
成果方:河北农业大学
合作方式:技术转让
成果类型:发明专利,
行业领域
农业技术
成果描述

本发明提供了一种提高棉花转基因效率的方法,所述方法含有以下步骤:a.采用农杆菌介导法将含有目的基因的植物表达载体侵染棉花无菌苗茎尖,将侵染后的棉花茎尖置于共培养培养基上进行共培养;b.共培养后,将棉花茎尖转入筛选培养基上培养;所述共培养培养基与筛选培养基中均含有浓度为0.3mg/L的KT和浓度为0.2mg/L的IAA。利用本发明方法进行无菌苗培养时间2?3天,共培养2天,筛选培养15?20天,生根培养20天,转化周期不超过2个月,且经筛选后阳性转化率能达到8%。

应用范围
利用基因工程技术对棉花进行遗传改良已取得重要进展。1987年Umbeck等首次报道通过农杆菌介导法将抗卡那霉素基因转入棉花(Umbeck P.Genetically transformed cotton(Gosspium hirsutum L.)Plants.Bio/Teehnology,1987,5:263~266)。传统的遗传转化方法转化周期长、植株再生的基因型依赖性强、再生苗畸形率高、移栽成活率低,成为限制棉花转基因育种研究的瓶颈。


前景分析
本发明的有益效果在于:
本发明通过设置不同的激素(组合),优化了农杆菌介导的茎尖转化技术体系,使转化周期缩短,转化率提高。利用本发明方法进行无菌苗培养时间2-3天,共培养2天,筛选培养15-20天,生根培养20天,转化周期不超过2个月,且经筛选后阳性转化率能达到8%。
目前能够获得再生植株的基因型多数为生产上淘汰的老品种,直接利用的价值不大,获得的转基因材料要通过杂交和多代回交,才能够在生产上利用,大大降低了转基因育种的利用价值。本发明采用的冀棉14农艺性状较传统的易转化的老品种好。
本发明中获得的转基因植株易生根,且易直接移栽,成活率达99%以上。移栽时土也不需要灭菌,较转基因苗的嫁接及直接移栽灭菌土省力又省时。
本申请选用生长2-3天的无菌苗茎尖为外植体,保证外植体的较强分裂和转化能力。外植体的侵染时间也影响转化率,侵染时间过长易引起后续实验中的污染,侵染时间过短又造成转化率低,因此本案中侵染15-20min,能保证较高的转化率。


联系方式

  • 联系人:

    吴金华

  • 联系电话:

    19933576696

  • 通讯地址:

    河北省保定市灵雨寺街289号

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