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一种发根农杆菌介导的大白菜转基因毛状根转化方法

  • 发布时间: 2025-01-10
预算 双方协商
基本信息
成果方:河北农业大学
合作方式:技术转让
成果类型:发明专利,
行业领域
农业技术
成果描述

本发明公开了一种发根农杆菌介导的大白菜转基因毛状根转化方法,包括以下步骤:S1、无菌苗的培养;S2、外植体的制备;S3、侵染菌液的制备;S4、侵染;S5、共培养;S6、转基因根诱导培养。本发明采用上述的一种发根农杆菌介导的大白菜转基因毛状根转化方法,采用种子萌发阶段暗培养,组培苗的胚轴长,因此需要种子少,试验外植体更多,可以获得更多的毛状根诱导。

应用范围
目前,瞬时转化常用的手段主要有以下几种,通过电击或聚乙二醇(PEG)渗透的方式转化原生质体。颗粒(钨或金粉)轰击植物表皮细胞或叶片,又称基因枪法。然而,原生质体的培养费时并且成功率低,基因枪又需要专门的配套设备。使得这两种方法很难得到广泛的应用。农杆菌介导的瞬时转化与传统的遗传转化相比具有低成本、易操作、成功率高的优点。农杆菌介导的瞬时表达可应用于多种研究当中,包括基因表达检测、基因沉默、亚细胞定位、蛋白互作分析等。
发根农杆菌介导的毛状根转化能高效地诱导植物产生转基因根,为研究相关基因在根中的生物学功能提供了一种方便、快捷的途径。发根农杆菌(Agrobacteriumrhizogenes)侵染植物后可通过Ri质粒(root‑inducingplasmid)的T‑DNA将rol基因稳定整合到宿主植物基因组中,诱导植物产生大量高度分枝的不定根,同时也可将Ti质粒(tumor‑inducingplasmid)中携带的外源基因整合到植物基因组中。毛状根在形态学上保持了植物根系统的特征并具有遗传稳定性,是研究植物根特异性表达基因、解析植物根系发育调控基因功能的良好材料。


前景分析
其技术效果如下:
(1)直接用大白菜无菌苗做为外植体,取材方便,不仅减少所使用仪器的费用,使实验操作技术容易在普通实验室进行,而且周期短、效率高。
(2)建立的转基因毛状根体系为今后大白菜基因功能解析奠定基础;同时,也为后续利毛状根诱导完整的转基因再生植株提供稳定的材料。


联系方式

  • 联系人:

    孙晓雪

  • 联系电话:

    19932581850

  • 通讯地址:

    河北省保定市灵雨寺街289号

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