本发明涉及病原检测技术领域,具体公开一种检测生姜腐烂病病原的LAMP引物组、LAMP试剂盒及其应用。所述检测生姜腐烂病病原的LAMP引物组包括一对外引物F3和B3,一对内引物FIP和BIP,F3的序列如SEQ ID NO:1所示,B3的序列如SEQ ID NO:2所示,FIP的序列如SEQ ID NO:3所示,BIP的序列如SEQ ID NO:4所示。利用本申请的LAMP引物组,可准确检测出生姜腐烂病病原(阴沟肠杆菌、阿氏肠杆菌、弗氏柠檬酸杆菌),特异性强、灵敏度高,对生姜腐烂病病原的最低检测限为10fg/μL,对控制生姜腐烂病病害发生、规避病害流行风险以及提高生姜产量和经济效益具有重要意义。
环介导等温扩增结束后,向扩增产物中加入0.5μL的SYBR Green I核酸染料后观察颜色变化,若是颜色呈荧光绿色,说明待测物中含有生姜腐烂病病原肠杆菌DNA片段;若是颜色不发生变化,还呈现荧光染料本身的颜色橙色,说明待测物中不含有生姜腐烂病病原肠杆菌DNA片段,或是含有其他其他病原菌,并未发生扩增反应。