农业技术

本发明公开了一种树莓芽的组培快繁的接种方法，属于植物组织培养技术领域。本发明选择树莓木质化、半木质化茎上饱满健康的芽，剥去芽表面的鳞片，切下芽，用质量浓度75％的酒精消毒，无菌水漂洗，接种至培养基中培养。接种第30d芽的污染率为4％～10％、褐死率为0～6％、有效萌发率为90％，芽生长良好。本发明通过以芽为外植体、消毒前不水洗及剥芽鳞的方法减少了污染；用75％的酒精消毒避免了用剧毒试剂升汞和有刺激性的次氯酸钠消毒；操作简单、省时省力省水省试剂省空间省成本、安全环保，提高了接种质量和效率，适于科研和工厂化的组培育苗领域，为树莓继代增殖、再生体系建立、转基因及基因编辑培育新种质奠定坚实的材料基础。

提高繁殖效率：该接种方法能够快速繁殖树莓芽，大幅缩短育苗周期，满足大规模种植的需求，提高生产效率。

保持品种优良性：通过组培快繁技术，确保树莓芽的遗传稳定性，保持品种的优良特性，提高果实品质和产量。

本发明公开提供了一种树莓芽的组培快繁的接种方法，取得的有益效果为：(1)本发明通过以饱满且无病虫害、无机械损伤、健康的芽为外植体及剥芽鳞片的方法减少了外植体本身的污染，避免了接种树莓木质化、半木质化的带刺茎段的污染风险和接种难度，操作简单、省时、省力、省空间；(2)本发明通过消毒前不水洗的方法避免水将外面的菌带入有髓结构的带芽茎段内部而导致的污染，进而避免研究人员将水洗引入的污染误认为是内生菌引起的污染；(3)以“饱满、健康的芽的内部没有菌”为理论基础，本发明仅用质量浓度75％的酒精溶液消毒剥去表面1～3层芽鳞的芽，就获得了很好的消毒效果；(4)使用质量浓度75％的酒精溶液消毒避免了使用剧毒试剂升汞和有刺激性的次氯酸钠消毒；(5)本发明用一种操作简单、省时省力省水省试剂省空间省成本、安全环保、优质高效的方法完成了树莓组培快繁技术中的接种环节，极大地降低了技术难度和复杂度，提高了接种质量和效率，适用于科研和工厂化的组培育苗领域，为后续的树莓继代增殖、再生体系的建立、转基因及基因编辑培育新种质奠定坚实的材料基础。