一种大白菜茎尖冷冻切片的制备方法
本发明公开了一种大白菜茎尖冷冻切片的制备方法,涉及显微组织切片技术领域,配置10ml固定剂(75%OCT+25%无菌水)待用,准备高压灭菌镊子、刀片、无RNA酶的离心管、培养皿、包埋盒,选择长势良好的大白菜植株,将外叶切除,保留中间部分,包含长度约0.5cm的幼叶及叶原基包裹的顶端分生组织;将根部切除,保留下部2mm左右的胚轴,将此部分白菜组织浸泡在装有10ml 75%OCT的离心管中,置于冰上,抽真空10min以固定组织。本发明解决了现有技术因固定液含有乙醇导致的植物组织活性丧失的问题,同时克服了白菜组织含水量大,易形成冰晶,难以保持组织结构完整的问题,保证了样品中RNA不被降解,为大白菜茎尖组织结构观察及后续相关转录组学研究提供了强有力的保障。
提升科研效率:该制备方法能够快速获得高质量的大白菜茎尖冷冻切片,为植物生理学和分子生物学研究提供可靠样本,加速科研进程。
优化教学实验:冷冻切片技术适用于植物学教学实验,帮助学生更直观地观察大白菜茎尖的细胞结构,提升教学效果。
推动育种研究:通过冷冻切片分析大白菜茎尖的组织结构,为育种研究提供重要数据支持,加速优质品种的选育和推广。
促进农业技术发展:该技术为植物组织学研究提供新工具,助力农业科技的创新与应用,推动现代农业的可持续发展。
本发明制备的白菜组织冷冻切片操作流程简单、制作周期短,切出的成片厚度均匀、结构清晰,采用75%OCT真空的方法对白菜组织进行固定,解决了现有技术因固定液含有乙醇导致的植物组织活性丧失的问题,同时克服了白菜组织含水量大,易形成冰晶,难以保持组织结构完整的问题,保证了RNA不被降解,为白菜组织结构研究及后续高通量转录组学等分子实验提供了强有力的保障。
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赵建军
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